Tampão TAE, 50X concentrado – Solução Estéril – NOVA BIOTECNOLOGIA
O Tampão TAE (Tris-Acetato-EDTA) 50x concentrado – Solução Estéril é um reagente de laboratório amplamente utilizado em biologia molecular, principalmente em técnicas de eletroforese de gel de agarose para a separação de ácidos nucleicos como DNA e RNA. O TAE atua como um meio condutor, facilitando a corrente elétrica que separa os fragmentos de DNA por tamanho durante a eletroforese. A solução é chamada de “50x concentrada” porque é fornecida em uma forma altamente concentrada que deve ser diluída 50 vezes com água para obter a concentração final de trabalho (1x).
A composição do Tampão TAE 50x inclui:
- Tris (hidroximetil) aminometano, que atua como a base para o tampão.
- Ácido acético, que ajuda a ajustar o pH do tampão.
- EDTA (ácido etilenodiaminotetracético), que se liga a íons metálicos que podem degradar o DNA ou interferir com a eletroforese.
Quando diluído para a concentração de trabalho (1x), o TAE proporciona um ambiente de pH estável necessário para a eletroforese e o EDTA presente na solução ajuda a proteger o DNA contra danos causados por nucleases, enzimas que podem quebrar o DNA. O termo “Solução Estéril” indica que o tampão foi esterilizado, geralmente por autoclavação, para evitar contaminação por microorganismos.
A solução estéril pronta para uso é conveniente para os laboratórios, pois economiza tempo e reduz o risco de erros de preparação, sendo também mais segura devido à esterilização que minimiza o risco de contaminação
- O tampão TAE é constituído pela mistura do Tris / Ácido Acético /EDTA, concentrada 50 X, permitindo preparar ao todo 5L de solução concentrada 1X.
- Com este tampão diluído é possível obter uma excelente resolução e definição de fragmentos de DNA em eletroforese em géis de agarose.
- Apresenta capacidade limitada – os íons contidos nesse tampão são consumidos rapidamente.
- O DNA fita dupla de elevado peso molecular migra aproximadamente 10% mais rápido no TAE que em outros tampões.
Aplicação:
- Utilizado como tampão na preparação de géis de agarose.
Manipulação:
- Em contato acidental com a pele, olhos e mucosas lavar abundantemente com água.
- Para evitar maiores acidentes trabalhar com máscara e equipamentos de proteção individual.
Especificações Técnicas:
- Concentração: Tris-Acetato 2M, EDTA 0,05M, pH 8,0.
Armazenamento:
- Entre 2°C e 25°C.