O que é Ágar Hecktoen – Função, Composição.

Vamos entender o Ágar Hecktoen? O que é esse Meio de Cultura?

O meio de cultura é de fundamental importância para a maioria dos testes microbiológicos: obter culturas puras, cultivar e contar células microbianas e cultivar e selecionar microrganismos. Sem um meio de cultura de alta qualidade, a possibilidade de obter resultados de testes microbiológicos precisos, reprodutíveis e repetíveis é reduzida. Vamos agora de bate papo técnico sobre o Ágar Hecktoen.

Vamos falar sobre o Ágar Hektoen?

O Ágar Hecktoen (HE) é um meio seletivo e diferencial projetado para isolar e diferenciar membros das espécies Salmonella e Shigella de outras Enterobacteriaceae. Os sais biliares e os corantes azul de bromotimol e fucsina ácida inibem o crescimento da maioria dos organismos Gram positivos. Lactose, sacarose e salicina fornecem carboidratos fermentáveis ​​para estimular o crescimento e a diferenciação de entéricos.

O Ágar Hektoen Enteric (HE) é um meio de cultura seletivo e diferencial utilizado principalmente em laboratórios de microbiologia clínica para o isolamento e diferenciação de bactérias entéricas, especialmente Salmonella e Shigella, que são patógenos intestinais responsáveis por infecções gastrointestinais.

Características do Ágar Hektoen Enteric:

1. Seletividade: Inibe o crescimento de bactérias Gram-positivas e muitas bactérias Gram-negativas que não são de interesse, favorecendo o crescimento de Salmonella e Shigella. Isso é conseguido através de componentes como sais biliares e corantes (bromotimol blue e fucsina ácida).

2. Diferencialidade: Permite a diferenciação entre as bactérias com base em duas propriedades:

   • Fermentação de açúcares: Bactérias que fermentam lactose, sacarose ou salicina produzem colônias de cor amarela a laranja (indicando fermentação de carboidratos e acidificação do meio).
   • Produção de sulfeto de hidrogênio (H₂S): Bactérias que produzem H₂S, como algumas Salmonella, formam colônias com centros negros, devido à reação do H₂S com o sulfato de ferro presente no meio.

Componentes Principais do Ágar Hecktoen

• Carboidratos fermentáveis: Lactose, sacarose e salicina, que servem para diferenciar as bactérias que fermentam açúcares.
• Sulfato de ferro e tiossulfato de sódio: Detectam a produção de H₂S.
• Corantes: Bromotimol blue e fucsina ácida, que indicam as mudanças de pH (ácido ou alcalino).

Aplicações:

• Isolamento de patógenos gastrointestinais: É amplamente utilizado em amostras fecais para detectar a presença de Salmonella e Shigella, patógenos que não fermentam os açúcares presentes no meio.
• Monitoramento em vigilância sanitária: Por ser eficaz na identificação de patógenos entéricos, é utilizado em laboratórios que fazem análises de alimentos e água.

Como atua o Meio de Cultura

O Meio de Cultura Ágar Hecktoen Enteric (HE) atua de forma seletiva e diferencial, permitindo o isolamento e a identificação de bactérias entéricas patogênicas, especialmente Salmonella e Shigella, em meio a outras bactérias presentes em amostras clínicas ou ambientais. Aqui está um detalhamento de como ele atua:

1. Ação Seletiva

O Ágar Hecktoen Enteric contém componentes que inibem o crescimento de bactérias Gram-positivas e muitas bactérias Gram-negativas que não são o foco da análise. Isso ocorre devido à presença de:

• Sais biliares: Esses compostos são os principais agentes seletivos do meio. Eles inibem a maioria das bactérias Gram-positivas e, em menor grau, algumas Gram-negativas, permitindo que o crescimento de patógenos entéricos como Salmonella e Shigella seja favorecido.
• Corantes (bromotimol blue e fucsina ácida): Esses corantes também desempenham um papel na seletividade, inibindo o crescimento de algumas bactérias indesejadas.

2. Ação Diferencial

O Ágar Hecktoen  também diferencia as bactérias com base em duas propriedades: a fermentação de carboidratos e a produção de sulfeto de hidrogênio (H₂S).

a) Fermentação de Carboidratos

O meio contém três carboidratos fermentáveis: lactose, sacarose e salicina. Quando uma bactéria é capaz de fermentá-los, ocorre a produção de ácidos que diminuem o pH do meio, o que resulta em uma mudança de cor nas colônias:

• Colônias amarelas a alaranjadas indicam a fermentação de carboidratos. Bactérias que fermentam esses açúcares, como Escherichia coli, apresentam essa coloração devido à acidificação do meio.
• Colônias verdes ou transparentes indicam a incapacidade de fermentar os açúcares, como ocorre com Shigella e Salmonella.

b) Produção de Sulfeto de Hidrogênio (H₂S)

O meio também contém tiossulfato de sódio e sulfato de ferro, que permitem a detecção de bactérias que produzem sulfeto de hidrogênio (H₂S). Quando essas bactérias, como algumas cepas de Salmonella, produzem H₂S, o gás reage com o sulfato de ferro presente no meio, formando um precipitado negro, que aparece como um centro escurecido nas colônias.

• Colônias verdes com centros pretos indicam a produção de H₂S, característica típica de Salmonella.

3. Cor Indicadora de pH

O Ágar Hecktoen contém indicadores de pH que mudam de cor dependendo do ambiente ácido ou alcalino, facilitando a interpretação dos resultados:

• Bromotimol blue e fucsina ácida ajudam a visualizar mudanças de pH resultantes da fermentação de carboidratos.
• Bactérias que fermentam os açúcares liberam ácidos, o que acidifica o meio e muda a cor das colônias para amarelo/laranja.
• Se as bactérias não fermentam os carboidratos, o meio permanece básico, e as colônias aparecem verdes ou transparentes.

4. Interpretação Prática

• Salmonella: Cresce como colônias verdes ou transparentes com centros negros (devido à produção de H₂S).
• Shigella: Cresce como colônias verdes ou transparentes, sem centros negros (não produz H₂S).
• Outras bactérias Gram-negativas: Muitas bactérias não patogênicas ou entéricas fermentadoras de açúcar, como Escherichia coli, crescem como colônias amarelas ou alaranjadas.

Conclusão

O Ágar Hecktoen atua de maneira seletiva para isolar Salmonella e Shigella em amostras fecais e de alimentos, inibindo o crescimento de bactérias indesejadas e diferenciando as bactérias patogênicas com base na fermentação de açúcares e na produção de H₂S. Ele é uma ferramenta essencial em laboratórios de microbiologia clínica e sanitária para o diagnóstico de infecções gastrointestinais.

 

 

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