Você conhece o Ágar Chocolate? Qual a importância desse meio de cultura?
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A microbiologia, a ciência que estuda os micro-organismos, depende de meios de cultura específicos para isolar, crescer e estudar esses minúsculos seres. Um desses meios, amplamente utilizado em laboratórios clínicos, é o ágar chocolate. Mas, ao contrário do que o nome pode sugerir, não tem nada a ver com o delicioso doce. Vamos mergulhar no fascinante mundo desse meio de cultura!
O Que é Ágar Chocolate?
O ágar chocolate é um tipo de meio de cultura utilizado em laboratórios de microbiologia. O nome pode sugerir algo delicioso, mas na verdade, é assim chamado devido à sua coloração marrom, que lembra chocolate. A cor é obtida após o aquecimento do sangue até que os glóbulos vermelhos se rompam, um processo conhecido como hemólise.
Este meio é uma variação do ágar sangue, que é enriquecido com nutrientes adicionais e subprodutos do sangue hemolisado. A presença desses componentes faz do Ágar Chocolate um meio de cultura altamente nutritivo, ideal para o crescimento de uma ampla variedade de bactérias, incluindo aquelas que são fastidiosas, ou seja, mais exigentes em termos nutricionais.
O ágar chocolate preparado internamente é o ágar de sangue modificado que é aquecido para lisar as hemácias. A lise de eritrócitos libera nutrientes intracelulares como hemoglobina, hemina (fator X) e a coenzima nicotinamida adenina dinucleotídeo (NAD ou fator V) no ágar para utilização por bactérias exigentes.
A peptona fornece ao organismo nitrogênio, aminoácidos e outros elementos essenciais para o crescimento, o cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico, o ágar atua como agente solidificante.
Qual a importância do ágar chocolate para a microbiologia?
O ágar chocolate é um meio de cultura essencial na microbiologia, especialmente na área de bacteriologia. Aqui estão algumas das razões pelas quais o ágar chocolate é considerado importante:
Cultivo de Bactérias Exigentes: Algumas bactérias requerem um conjunto específico de nutrientes que estão presentes no Ágar Chocolate. Sem esses nutrientes, seria impossível estudá-las em laboratório.
Diagnóstico Clínico: Para o diagnóstico de doenças infecciosas, é vital isolar e identificar o patógeno causador. O Ágar Chocolate é essencial para cultivar bactérias responsáveis por infecções como meningite, gonorréia e outras doenças respiratórias.
Pesquisa e Desenvolvimento de Antibióticos: Ao testar a eficácia de antibióticos contra bactérias cultivadas neste meio, os pesquisadores podem desenvolver tratamentos mais efetivos contra patógenos resistentes.
Ensino e Treinamento: O ágar chocolate é amplamente usado em ambientes acadêmicos para educar estudantes sobre técnicas de cultivo e identificação bacteriana.
Preparação do Ágar Chocolate
Ingredientes:
Base de Ágar sangue ou um ágar nutritivo similar.
Sangue de cavalo, ovelha ou coelho.
Passos:
Aquecimento: O sangue é aquecido a 56°C durante uma hora, resultando na hemólise das células sanguíneas, o que dá ao meio a sua característica cor marrom.
Mistura: Adicione o sangue hemolisado à base do ágar nutritivo.
Autoclavagem: Após a mistura, o meio é esterilizado em autoclave a 121°C durante 15 minutos.
Solidificação: Após a autoclavagem, permita que o meio esfrie e solidifique em placas de Petri.
Como usar o Ágar Chocolate:
Coleta e Semeadura: Coleta-se uma amostra clínica do local de interesse (por exemplo, uma zaragatoa de garganta) e semeia-se no Ágar Chocolate.
Incubação: As placas são então incubadas em uma atmosfera rica em CO₂, geralmente a 35-37°C por 24-48 horas.
Observação: Após o período de incubação, verifique o crescimento bacteriano. As bactérias patogênicas terão características distintas que podem ser identificadas com base na aparência, cor e tamanho das colônias.
Testes Adicionais: Se necessário, faça testes bioquímicos adicionais para confirmar a identidade da bactéria.
Composição do Ágar Chocolate
A composição do ágar chocolate pode variar ligeiramente dependendo do fabricante e do protocolo específico, mas geralmente contém os seguintes componentes básicos:
Base de Ágar Sangue: Geralmente, o ágar chocolate utiliza uma base de ágar sangue, que é ágar enriquecido com sangue. O sangue é tipicamente de origem ovina ou equina.
Sangue Hemolisado: O componente mais característico do ágar chocolate é o sangue que foi hemolisado (ou seja, os glóbulos vermelhos foram destruídos) pelo aquecimento. Este processo libera fatores de crescimento como hemina (fator X) e NAD (fator V), essenciais para o crescimento de certos patógenos.
Nutrientes: O meio contém nutrientes básicos que suportam o crescimento bacteriano, incluindo peptonas (fontes de nitrogênio e vitaminas), sais e, às vezes, glicose ou outros carboidratos para fornecer uma fonte de energia.
Indicadores de pH: Alguns tipos de ágar chocolate podem conter indicadores de pH que ajudam a identificar certos tipos de bactérias com base nas alterações de pH que elas causam no meio.
Suplementos Opcionais: Dependendo do uso específico, podem ser adicionados antibióticos ou outros suplementos para inibir o crescimento de microrganismos indesejados e favorecer o crescimento dos organismos de interesse.
O ágar chocolate é utilizado para cultivar uma ampla gama de bactérias, especialmente aquelas que requerem fatores de crescimento adicionais, como Haemophilus spp. e Neisseria spp. Após a inoculação e incubação, as colônias bacterianas podem ser observadas e submetidas a testes adicionais para identificação.
Usos do Ágar chocolate
O ágar chocolate é amplamente utilizado em laboratórios de microbiologia para diversas finalidades, especialmente devido à sua capacidade de suportar o crescimento de bactérias exigentes. Aqui estão alguns dos principais usos do ágar chocolate:
Cultivo de Bactérias Exigentes: O ágar chocolate é especialmente útil para o cultivo de bactérias que requerem fatores de crescimento adicionais, como Haemophilus influenzae e Neisseria gonorrhoeae. Estas bactérias não crescem bem em meios de cultura comuns, mas se desenvolvem no ágar chocolate devido à presença de fatores de crescimento liberados pelo sangue hemolisado.
Diagnóstico de Infecções Respiratórias: É frequentemente usado para isolar e identificar patógenos associados a infecções respiratórias, como pneumonia e bronquite.
Diagnóstico de Doenças Sexualmente Transmissíveis (DSTs): Neisseria gonorrhoeae, o agente causador da gonorreia, é frequentemente isolada utilizando ágar chocolate.
Isolamento de Patógenos em Amostras Clínicas: Utilizado para isolar bactérias a partir de uma variedade de amostras clínicas, incluindo sangue, secreções respiratórias, swabs de garganta e nariz, e amostras genitais.
Pesquisa em Microbiologia: Além do uso clínico, o ágar chocolate é usado em pesquisas para estudar as características de crescimento, morfologia e outras propriedades biológicas de bactérias exigentes.
Testes de Sensibilidade a Antibióticos: Pode ser usado para realizar testes de sensibilidade, observando como diferentes bactérias reagem a vários antibióticos.
Identificação Bacteriana: Após o crescimento no ágar chocolate, as bactérias podem ser submetidas a uma série de testes bioquímicos e morfológicos para sua identificação precisa.
Em resumo, o ágar chocolate é um meio de cultura extremamente versátil e valioso na microbiologia, essencial para o diagnóstico e pesquisa de uma variedade de organismos bacterianos.
Limitações do Ágar chocolate
Como o ágar chocolate é um meio enriquecido, ele se contamina com muita facilidade.
O uso de ágar chocolate apenas dificulta a diferenciação de organismos não patogênicos de patogênicos, uma vez que os primeiros supercrescem bactérias patogênicas.
O ágar chocolate tem uma concentração reduzida de ágar, de modo que a superfície do prato é frágil e propensa a arranhões durante a formação de estrias.
Embora seu nome possa evocar imagens de sobremesas e doces indulgências, o Ágar Chocolate é um componente crítico para a microbiologia médica e pesquisa. Ele desempenha um papel vital no diagnóstico de doenças, no desenvolvimento de novos medicamentos e na compreensão fundamental de patógenos que afetam a saúde humana. Ao fornecer um ambiente propício para o crescimento de organismos exigentes, o Ágar Chocolate nos ajuda a desvendar mistérios microscópicos que têm impactos macroscópicos em nossa sociedade.
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